Klorofyll er et grønt pigment som finnes i høyere planter og alle andre fotosyntetiske organismer. Klorofyll A og klorofyll B er løselige i etanol, eter og aceton og andre løsningsmidler, uløselige i vann og petroleumseter, kan derfor bruke polare løsningsmidler som aceton, metanol, etanol, etylacetat og så videre for å ekstrahere klorofyll.
Klorofyllekstraksjonsprosess:
Klorofyllekstraksjon tilberedes i et halvmørkt rom ved 25 grader C. Ekstraksjonstrinnene er som følger:
(1) Ta 1000 gram friske grønne blader og knus dem i en Wechsler.
(2) Legg de knuste 1000 gram grønne bladene i aceton med en liten mengde kalsiumkarbonat (temperatur 20 grader) for ekstraksjon, til bladfragmentene er fargeløse etter filtrering og rengjøring.
(3) Ha det filtrerte acetonekstraktet i en trakt som inneholder 1 liter petroleumseter og 100 ml aceton, og roter deretter forsiktig mens du tilsetter destillert vann til det er lagdelt. Mesteparten av aceton og vannløselige urenheter i vannlaget kastes, og etterlater bare petroleumseterløsning.
(4) Etter at petroleumseterløsningen er renset igjen med destillert vann, rengjøres den mer enn 5 ganger med 200ml80 prosent metanolløsning inneholdende petroleumseter og 0,01g oksalsyre, og til slutt oppnås gulgrønn suspensjon .
(5) Tørk suspensjonen med vannfritt natriumsulfat, og infiltrer den inn i en kolonne laget av 3 cm tykt sukrosepulver. Rengjør deretter de utfelte pigmentene for å fjerne karotenoider og få dem til å kun inneholde naturlig klorofyll.
(6) Sukrosekolonne som inneholder naturlig klorofyll er delt i to lag, det grønne laget har 4-10mm klorofyll B-lag, det andre blå laget er 2-6mm klorofyll A-lag.
(7) Den delen som ligger i midten av det blå laget (omtrent halvparten av det blå laget) legges i eter, suspensjonen filtreres og ekstraheres, renses med destillert vann, tørkes med natriumsulfat og filtreres med redskaper for å oppnå klorofyll EN.
(8) Fjern den midtre delen av det grønne laget i (6), og legg det raskt inn i eteren for filtrering og vasking for å lage klorofyll B eterløsning.
Hvordan skilles under utvinning?
Kromatografi er en viktig metode for separasjon, rensing og identifikasjon av organiske forbindelser, spesielt i mikroanalyse er mye brukt. Pigmenter i frukt og grønnsaker inkluderer hovedsakelig fettløselig karoten, lutein, klorofyll og vannløselig antocyanin. I ekstraksjonseksperimenter kan vi benytte oss av prinsippet om lignende blandbarhet vannløselig antocyaninfiltrering, som igjen kan gjøre bruk av tynnsjiktskromatografi, kolonnekromatografi, høyytelses væskekromatografi (HPLC) til separasjon av betakaroten, lutein og klorofyll, svekket på grunn av polariteten til de tre pigmenttypene, kan passende velge enkelt organisk løsningsmiddel eller forskjellig forhold mellom blandet løsningsmiddel som ekspansjonsmiddel og elueringsmiddel. De optimale separasjonsforholdene ble bestemt.
